客户定制PCR Array产品
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客户定制PCR Array产品

PCR Array简介

实时荧光定量PCR是通过在实验过程中,实时监测荧光染料的信号变化,反映样品中的基因表达量的实验方法。因为实时定量PCR线性范围广因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。对于一般客户而言,由于实时定量PCR需要同时分析内参基因和目标基因,因此,每次实验只能检测少数几个基因的表达水平,若要检测大量基因,则需要一定的经验来优化反应体系、优化引物设计等,工作量巨大,耗时长久。

因此我们公司提供经过优化的实时定量PCR体系,并将引物与反应的PCR板交联,使得研究者自身仅需提供样本,即可以同时方便研究大量基因。这个产品既可以进行某些特定的信号通路的研究,也可以作为验证芯片结果的方法,产品具有很好的稳定可靠性。

客户定制PCR Array

在现在各类研究需求中,每个研究者对于自己的实验方案有着特殊的要求,有研究者的方案对于某个通路中多数基因进行检测,也有研究者着重对于多个通路中的若干个基因进行研究。至于基因通路的组合跟时千差万别,供应商提供的某类产品其实很难满足多数客户的需求。因此我公司推出客户定制PCR Array,根据客户的要求开发定量方案。我公司用多年的经验,有能力根据客户的经验设计相关基因的引物,并在短时间内完成定量PCR的优化,为客户提供稳定的多基因检测PCR Array产品。图1为我公司的若干定制PCR Array96孔板排布方式。 

定制PCR Array的产品形式

客户定制PCR Array的定制流程

客户提供需要定制的基因名字和所需采购的产品数量;并提供一个“样本”以方便公司建立实验方案。客户提供样本是考虑基因表达具有组织特异性,既有表达量的特异性,也有转录形式的特异性(一个基因有多个转录本,这是剪切调控的结果)。因此客户提供和自己实验相关的样本,我们设计的引物及优化反应条件更有针对性,更稳定。

我公司第一步进行针对性引物设计,并对反应条件进行优化,将引物在同一个反应条件下都能有效工作。

我公司第二步将引物和PCR反应体系进行产品化,并销售给客户。

客户进行实验,简单说,客户只要将自己逆转录的cDNA和我们提供的SYBR mixture混合后分装至96孔板中,然后根据我们的说明书设置PCR程序,等待反应完成后进行数据分析。客户可自行分析数据,也可交由我公司,由我公司协助进行分析。

 

客户实验流程详解:

1. RNA制备:从样本中抽提RNA,一般要求RNA浓度达到几百纳克,260/2801.8-2.1.

2.cDNA制备:RNA逆转录成cDNA

3.混样及分板:将样本cDNASYBRMixture均匀混合,评分支孔板中。

4.荧光定量PCR根据说明书设置定量PCR仪的程序,并运行。关于反应程序优化,因为我公司提供的反应程序有很大的宽容性,所以只要是一般96孔板的实时荧光定量PCR仪都能设置相同的反应条件。

5.数据分析:客户可自行分析,也可由公司协助分析。