稳定细胞株构建
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稳定细胞株构建

候选基因的功能研究,其中最常用的手段之一便是构建细胞模型,在宿主细胞中使该基因过量表达或者沉默表达,常规实验手段有瞬时转染和筛选稳定细胞系。

构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性/荧光标签的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,根据载体中所含的不同抗性标志进行靶细胞筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。 构建完成稳定细胞株为后续的功能实验,蛋白相互作用验证等研究带来很大便利。

相较于质粒转染筛选单克隆方法,利用慢病毒感染宿主细胞的方法更方便和高效,是目前主流的稳定细胞系筛选方法。慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达,因此,慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。

 

服务流程

 

 生产流程

 

 

 

稳定细胞株结果实例图

服务优势

l  多种荧光标记和抗性基因可选

l  稳定先进的慢病毒包装技术

l  丰富的细胞培养经验

l  专业的技术服务团队